### 支原体概念与污染影响

支原体（Mycoplasma），又称霉形体，是已知的最小和最简单的无细胞壁原核生物，直径约为0.1~0.3微米，能够穿过滤膜并呈现高度的多形性。这使其成为哺乳动物细胞培养中相对常见且难以检测的污染物。由于支原体具有形成丝状与分枝形状的能力，因此被命名为支原体。

在生物学分类中，支原体属于柔膜菌门、柔膜菌纲，并进一步分为多个目和科。其中尤以支原体目和支原体科的研究较为广泛，主要包括支原体属和脲原体属。支原体的污染对细胞培养造成多方面的不良影响，已成为细胞培养中的严重问题，保守估计常规细胞培养中的支原体污染率为15%至35%。这种污染会对实验结果的可信度造成显著干扰。

细胞培养中约95%的支原体污染源于莱氏无胆甾原体、精氨酸支原体、口腔支原体、发酵支原体、人型支原体和猪鼻支原体。支原体在培养基上形成的菌落呈现“煎鸡蛋”状，细胞培养的上清液及细胞膜为支原体的生长提供了适宜的环境，它们甚至可以穿透宿主细胞膜。

支原体污染的主要来源包括细胞培养液及其成分（如培养基原料、血清和其他试剂）、实验室工作人员、细胞培养箱、液氮培养箱、空气中的粒子与气溶胶、抗生素的过度使用以及密封不当的细胞培养物等。与此同时，这些污染的潜在危害包括：导致细胞制品或基于细胞介质的产品在后续纯化过程中因未能有效去除支原体而面临批次报废；污染相关设备和中间或最终产品；影响其他正常细胞的安全；以及造成重要细胞或病毒种子库的报废。此外，实验室整体环境受到污染时，可能被迫停止生产或实验操作以进行支原体去除。

为了确保科学研究工作的正常进行，定期进行支原体检测和去除绝对必要，只有在确保细胞培养体系内无支原体的情况下，才能保障实验的可靠性。

### 支原体检测方法介绍

在生物制药和细胞研究中，支原体污染是一个亟需解决的问题，因为它可能会影响实验结果及产品质量。因此，支原体检测对确保细胞培养物和生物制品的安全性与可靠性至关重要。

目前常用的支原体检测方法包括培养法、PCR（聚合酶链式反应）法、荧光染色法、ELISA（酶联免疫吸附试验）法、qPCR（实时定量PCR）、代谢活性测定等。各种方法的优缺点如下：

1. **培养法**：灵敏度高，但需要建立P2实验室，检测周期长可达28天，且可能存在交叉污染。

2. **指示细胞法**：灵敏度高且成本低，但检测周期为7天，且灵敏度较低。

3. **NAT法**：灵敏度高，适用于快速检测，但结果可靠性依赖于样本质量，可能因交叉污染产生假阳性。

4. **ELISA法**：实验简单快速，依赖于抗体，存在一定局限性。

5. **ATP酶法**：灵敏度高，操作简便，但需配合荧光检测仪器。

6. **等温扩增法**：实验简单快速，但易受到样本基质干扰。

在选择适合的支原体检测方法时，应考虑检测结果的应用目的，包括是否用于产品放行，是否符合法规要求等。如果支原体检测涉及产品放行，则需采用药典规定的方法，如培养法或指示细胞法；如果是日常检测或研发早期的细胞，快速支原体方法则应为首选。

### 金年会的支原体PCR检测试剂盒

金年会品牌提供了一系列支原体快速检测的试剂盒，包括基于NAT的支原体PCR检测试剂盒。我们的支原体PCR检测试剂盒（巢式PCR）适用于多种生物材料的支原体感染检测，具备高灵敏度，快速检测等优点，可有效避免因引物与模板之间的非特异配对导致的假阴性结果。

总之，定期进行支原体检测是确保细胞培养物及生物制品质量的重要步骤。选择符合您需求的检测方法，保障科研工作的顺利开展，是金年会始终坚持的服务宗旨。我们的产品将助力您的科学研究，确保诚信至上的品牌承诺。