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人巨噬细胞炎性蛋白5 (MIP-5) ELISA试剂盒说明——金年会金字招牌诚信至上

发布时间:2025-03-10   信息来源:尊龙凯时官方编辑

本试剂盒仅限于科学研究用途,不可用于医学诊断。人巨噬细胞炎性蛋白5(MIP-5)ELISA试剂盒使用说明书中的检测原理为双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。该方法在预先包被adropin(AD)抗体的微孔中依次添加样本、标准品和HRP标记的检测抗体,经过温育与充分洗涤后,使用TMB作为底物显色。在过氧化物酶的催化下,TMB转化为蓝色,随后在酸性条件下变为最终的黄色。颜色的深浅与样品中adropin(AD)的浓度呈正相关。通过酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),据此计算样品浓度。

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样品的收集、处理和保存方法如下:

1. 血清:使用无热原和内毒素的试管,操作过程中应避免任何细胞刺激。血液收集后,以3000转/分钟的速度离心10分钟,迅速且小心地分离血清和红细胞。

2. 血浆:抗凝剂可使用EDTA、柠檬酸盐或肝素,离心条件为3000转/分钟,离心30分钟后取上清液。

3. 细胞上清液:将样品以3000转/分钟离心10分钟,去除颗粒和聚合物。

4. 组织匀浆:将组织与适量的生理盐水混合并捣碎,随后以3000转/分钟离心10分钟取上清。

5. 保存:若样本未及时检测,请按一次使用量分装,储存于-20℃,避免反复冻融,并在室温下解冻,确保样品充分均匀解冻。

操作注意事项和必要物品:

本试剂盒的组成中,标准品(S0-S5)浓度依次为:0、25、50、100、200、400pg/mL。

试剂准备:20×洗涤缓冲液需按1:20稀释,即1份的20×洗涤缓冲液加入19份蒸馏水中。洗板步骤请遵循操作说明。

结果判定:绘制标准曲线,在Excel中以标准品浓度为横坐标,对应的OD值为纵坐标,构建线性回归曲线,并根据曲线方程计算各样本浓度值。

需要注意的是,本试剂盒的性能及使用限制,请在使用前仔细阅读说明。始终牢记我们的品牌理念——金年会金字招牌诚信至上,确保您获得高质量的科研结果。